BG Heparin FF 亲和层析介质

1、产品简介

BG Heparin FF 亲和层析介质是一种含硫酸酯的酸性多糖，能和抗凝血因子III、凝血酶、类凝血酶、人凝血因子结合，也能和大肠杆菌表达的人白介素、人前列腺生长因子、重组人血管内皮生长因子、软骨生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、重组人酸性成纤维细胞生长因子、重组肝细胞生长因子、重组鼠肝素辅因子II、重组人血小板第四因子、重组人内皮抑素、重组人角质细胞生长因子等生物大分子结合。博进生物开发的肝素亲和层析介质，以琼脂糖软胶作为基质，采用肝素作为配基，适用于上述凝血因子类生物分子的纯化。可以满足捕获、中度纯化、精细纯化、分析纯化各环节的应用，可为客户提供生物样品从实验室纯化到工业化生产的整体解决方案。

2、产品参数

表1：博进肝素亲和系列介质参数总览

3、使用方法 

     BG Heparin FF 亲和层析介质用于抗凝血因子III、凝血酶、类凝血酶、人凝血因子IX、XI和VIII等生物大分子的分离纯化。层析操作通常包括装柱、平衡、进料、淋洗、洗脱、再生等步骤。

具体的操作方法如下：

3.1平衡：

     用5~10CV的平衡缓冲液（20-50mM PB或Tris-HCl，pH 7.4-8.0，可加入0.15M NaCl抑制非特异吸附）平衡层析柱，至流出液电导和pH不变（与平衡液一致）。

3.2上样：

     样品缓冲液应尽可能与平衡液一致。固体样品可用平衡液溶解配制；低浓度样品溶液可用平衡液透析；高浓度样品溶液可用平衡液稀释。为了避免堵塞层析柱，样品应经离心或微滤处理。进料量根据介质的载量和料液中目标蛋白的含量计算。

3.3淋洗：

     上样结束后继续用平衡缓冲液淋洗，直至紫外下降至基线。

3.4洗脱：

     用洗脱缓冲液（20-50mM PB或Tris-HCl+1-2M NaCl，pH7.4-8.0，NaCl浓度需要根据目标蛋白的结合力进行适当调整）洗脱，收集流出液。可采用线性梯度或阶越式梯度洗脱。

3.5原位清洗（CIP）：

    为了避免不同样品间的相互干扰，或者当介质污染比较严重时（反压增加），需要对介质进行在位清洗。

     1. 对于以离子键结合的蛋白，可用2~3CV以上的2M NaCl清洗，并用3CV以上的纯水冲洗。

     2. 对沉淀或变性蛋白蛋白，可用0.1M NaOH清洗（1~2h），并用3~10CV平衡液和3CV以上的纯水冲洗。也可用6M盐酸胍或者8M尿素清洗（0.5~1h）。

     3. 对疏水性结合的蛋白，可用0.1~0.5%的非离子去污剂清洗（1~2h），并用3~10CV的纯水冲洗。 

3.6保存：

      2~10 ℃（0.05M乙酸钠+20%乙醇）

3.7其它注意事项：

     在使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干或密封不严，防止气泡进入。

4、订购信息