抗体纯化介质（GP-ProA)
抗体纯化介质（GP-ProA）
1. 产品简介
抗体纯化介质（GP-ProA）通过偶联的 Protein A 配基特异性地与抗体的 Fc 区结合，经过一步亲和层析，即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗 体。抗体纯化介质（GP-ProA） 以超大孔聚甲基丙烯酸酯微球作为基质，以重组 Protein A 为配基，具有很高的物理化学稳定性，配基不易脱落，寿命长，使用方便，应用广泛。
2. 产品特性
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参数 |
指标 |
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基质 |
聚甲基丙烯酸酯 |
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配基 |
r-Protein A |
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平均粒径 |
70 μm±20μm |
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动态载量 |
30-40mg IgG/ml wet gel |
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最高耐压 |
1 MPa |
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pH 稳定性 |
3~ 12（长时间）；2~ 13（短时间） |
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保存 |
2~ 10 ℃（20%乙醇） |
3. 产品应用
抗体纯化介质（GP-ProA）广泛用于各种抗体的分离纯化。层析操作通常包括装柱、平衡、上样、淋洗、洗脱、再生等步骤。
平衡：用5~ 10CV 的平衡缓冲液（20 mM PB+0. 15M NaCl ，pH 7.0 ，添加适当 浓度的 NaCl 抑制非特异性吸附）平衡层析柱，至流出液电导和 pH 不变（与平衡液一致）。
上样：样品缓冲液应尽可能与平衡液一致。固体样品可用平衡液溶解配制；低浓度样品溶液可用平衡液透析；高浓度样品溶液可用平衡液稀释。为了避免堵塞层析柱，样品应经离心或微滤（0.45μm）处理。进料量根据介质的载量和料液中目标蛋白的含量来确定。
淋洗：上样完毕后继续用平衡缓冲液淋洗至基线。
洗脱：用洗脱缓冲液（20 mM 乙酸钠，pH 3.0-4.0 或 0. 1M 甘氨酸，pH 3.0）洗 脱，收集流出液。洗脱后，应立刻用碱性缓冲液（如 1M Tris/HCl, pH 9.0）将收集到的抗体溶液中和到中性，维持抗体的生物活性，避免抗体失活。
再生、原位清洗：介质使用数次（5- 10 次，具体次数与原料的种类和来源及实验要求有关）后，需要对介质进行再生、原位清洗。
（1） 用 0. 1M 的乙酸或 0. 1M 的乙酸或 20%乙醇淋洗柱子 3-5CV ，然后用缓冲液洗到中性即可重复使用；
（2） 也可用 0.05M NaOH+1M NaCl 或 6M 盐酸胍淋洗柱子 3-5CV ，并用 3~ 10CV 的纯水冲洗，然后用缓冲液洗到中性即可重复使用。
其它注意事项：在装柱、使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干，气泡进入。
