HPQ-30强阴离子交换介质
HPQ-30强阴离子交换介质
1. 产品简介
离子交换层析是生物大分子分离纯化最常用的方法。博进生物开发的 HPQ-30 强阴离子交换介质采用具有刚性结构的聚甲基丙烯酸酯微球作为基质，通过特有的表面修饰技术改善聚合物基质的亲水性，广泛用于蛋白质、酶、多糖、核酸等的精细纯化。
2. 产品特性
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参数 |
技术指标 |
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平均粒径 |
40±10 μm |
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孔径 |
30nm |
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基质 |
聚甲基丙烯酸酯 |
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功能基 |
季胺基（-CH2N+ (CH3)3） |
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功能基类型 |
强碱 |
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动态载量 |
≥30mg BSA/ml wet gel |
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最大耐压 |
1 MPa |
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pH 稳定性 |
可耐受 0.5M NaOH 溶液清洗 |
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保存 |
4~30℃（20%乙醇） |
3. 应用
HPQ-30 强阴离子交换介质用于蛋白质、酶、多糖、核酸等的精细纯化。其层析操作通常包括平衡、上样、淋洗、洗脱、再生等步骤。
具体的操作方法如下：
平衡：用 5~ 10CV 的平衡缓冲液（如 20 mM PB ，pH7.0 ，具体的缓冲体系应根据目标蛋白的稳定性和等电点进行筛选和优化）以不高于上限压力的流速平衡离子交换柱，至流出液电导和 pH 不变（与平衡液一致）。
上样：样品缓冲液应尽可能与平衡液一致，固体样品可用平衡液溶解配制；低浓度样品溶液可用平衡液透析或添加相应量的盐；高浓度样品溶液可用平衡液稀 释。为了避免堵塞层析柱，样品溶液应经离心或微滤（0.45μm）处理。上样量根据介质的载量和样品溶液中目标蛋白的含量计算。
淋洗：上样结束后继续用平衡缓冲液淋洗，直至紫外下降至基线。
洗脱：用洗脱缓冲液（如 20 mM PB+1M NaCl ，pH7.0）洗脱，洗脱方式可采用 pH 梯度洗脱、线性梯度洗脱或阶梯式梯度洗脱，收集流出液。
再生：每次层析之后可用 1-2M NaCl 清洗层析柱，除去强结合的蛋白。
原位清洗：介质使用 5- 10 次（具体次数与原料的种类和来源及实验要求有关）后，需要对介质进行原位清洗：
（1）对于通过离子键强结合的蛋白，可用 2M NaCl 清洗 3~4 CV；
（2）对沉淀蛋白、疏水性结合的蛋白、脂蛋白，可用1M NaOH 冲洗 3~4CV；
（3）对强疏水性结合的蛋白、脂蛋白和脂类物质，可用 70%乙醇或 30%异丙醇以不高于上限压力的流速冲洗 3~4CV（使用高浓度的有机溶剂时，为了避免产生气泡，应采用逐步增加有机溶剂浓度的方法）。
保存：4-30℃储存于 20%乙醇中；层析柱中的介质可用 20%的乙醇冲洗后保存于 4-30 ℃。
其它注意事项：在使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干或密封不严，防止气泡进入。
