CM弱阳离子交换介质
1. 产品简介
离子交换层析(IonExchangeChromatography)是根据生物分子表面电荷(种类、 数目和分布)特异性实现对生物大分子分离纯化最常用的方法。博进生物开发的CM弱阳离 子交换介质采用具有刚性结构的聚甲基丙烯酸酯微球作为基质,通过特有的表面修饰技术改 善聚合物基质的亲水性,同时通过特有的纳微 结构调控技术可实现30-1000nm不同孔径的 介质,充分满足多肽、重组蛋白、核酸、疫苗、抗体及其衍生物、病毒或类病毒颗粒等生物 大分子的分离纯化。博进该类型介质具有大通量的特点,尤其适用于粘稠料液。可根据客户 应用需求的不同提供不同尺寸与孔径的系列产品,可以满足捕获、中度纯化、精细纯化、分 析纯化各环节的应用,为客户提供生物样品从实验室纯化到工业化生产的整体解决方案。
2. 产品参数
表1:博进CM弱阳离子交换介质HP系列参数总览
| 技术指标/型号 | HPCM-30 | HPCM-60 |
| 平均粒径 | 40±10μm | 70μm±20μm |
| 孔径 | 30nm | |
| 基质 | 聚甲基丙烯酸酯 | |
| 功能基 | 羧甲基(-CH2 COO-) | |
| 功能基类型 | 弱酸型配基 | |
| 动态载量 | ≥40mg 溶菌酶 /ml wet resing el | ≥20mg 溶菌酶 /ml wet resin gel |
| 典型应用 | 重组蛋白、核酸等生物大分子的分离纯化 | |
| 最大耐压 | 1MPa | |
| pH稳定性 | pH3-13 | |
| 保存 | 2~30℃(20%乙醇) | |
表2:博进CM弱阳离子交换介质CP系列参数总览
| 技术指标/型号 | CPCM-30 | CPCM-60 |
| 平均粒径 | 40±10μm | 70μm±20μm |
| 孔径 | 100nm | |
| 基质 | 聚甲基丙烯酸酯 | |
| 功能基 | 羧甲基(-CH2 COO-) | |
| 功能基类型 | 弱酸型配基 | |
| 动态载量 | ≥20mg 溶菌酶 /ml wet resin gel | ≥20mg 溶菌酶 /ml wet resin gel |
| 典型应用 | 重组蛋白、核酸等生物大分子的分离纯化 | |
| 最大耐压 | 1MPa | |
| pH稳定性 | pH3-13 | |
| 保存 | 2~30℃(20%乙醇) | |
3.使用方法
博进CM弱阳离子交换介质广泛用于蛋白质、酶、多糖、核酸等的分离纯化。层析操作 通常包括平衡、上样、淋洗、洗脱、再生等步骤。
具体的操作方法如下:
平衡:用5~10CV的平衡缓冲液(如20mMPB,pH7.0,具体的缓冲体系应根据目标蛋白的 稳定性和等电点进行筛选和优化)以不高于上限压力的流速平衡离子交换柱,至流出液电导 和pH不变(与平衡液一致)。
上样:样品缓冲液应尽可能与平衡液一致,固体样品可用平衡液溶解配制;低浓度样品溶液可 用平衡液透析或添加相应量的盐;高浓度样品溶液可用平衡液稀释。为了避免堵塞层析柱, 样品溶液应经离心或微滤(0.45μm)处理。上样量根据介质的载量和样品溶液中目标蛋白 的含量计算。
淋洗:上样结束后继续用平衡缓冲液淋洗,直至紫外下降至基线。
洗脱:用洗脱缓冲液(如20m MPB+1M NaCl,pH7.0)洗脱,洗脱方式可采用pH梯度洗脱、 线性梯度洗脱或阶梯式梯度洗脱,收集流出液。
再生:每次层析之后可用1-2MNaCl清洗层析柱,除去强结合的蛋白。
原位清洗(CIP):介质使用5-10次(具体次数与原料的种类和来源及实验要求有关)后,需要对介质进 行原位清洗,可参考下表。 清洗溶液 清洗对象 清洗条件 2MNaCl 离子键强结合的蛋白 3~4CV 1MNaOH 沉淀蛋白、疏水性结合的蛋白、脂蛋白 3~4CV 不高于上限压力的流速冲洗3~4CV(使 强疏水性结合的蛋白、脂蛋白和脂类物质)。
保存: 用高浓度的有机溶剂时,为了避免产生 70%乙醇或30%异丙醇 气泡,应采用逐步增加有机溶剂浓度的 方法) 2-30℃储存于20%乙醇中;层析柱中的介质可用20%的乙醇冲洗后保存于2-30℃。 5.8 其它注意事项: 在使用和保存柱子的时候,要避免柱子流干或密封不严,防止气泡进入。
4.订购信息
| 产品名称 | 货号 | 规格 | 产品名称 | 货号 | 规格 |
| HPCM-30 弱阳离子交换介质 |
BG33-1210-02 | 50ml | HPCM-60 弱阳离子交换介质 |
BG33-1110-02 | 50ml |
| BG33-1210-04 | 500ml | BG33-1110-04 | 500ml | ||
| BG33-1210-05 | 1L | BG33-1110-05 | 1L | ||
| BG33-1210-07 | 10L | BG33-1110-07 | 10L | ||
| BG33-1210-08 | 20L | BG33-1110-08 | 20L | ||
| CPCM-30 弱阳离子交换介质 |
BG33-2210-02 | 50ml | CPCM-60 弱阳离子交换介质 |
BG33-2110-02 | 50ml |
| BG33-2210-04 | 500ml | BG33-2110-04 | 500ml | ||
| BG33-2210-05 | 1L | BG33-2110-05 | 1L | ||
| BG33-2210-07 | 10L | BG33-2110-07 | 10L | ||
| BG33-2210-08 | 20L | BG33-2110-08 |
20L |